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WIWAM高通量植物表型组学成像分析-拟南芥的全基因关联图谱

发表时间:2021-09-22 08:40:00点击:953

来源:北京博普特科技有限公司

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WIWAM高通量植物表型成像系统由比利时SMO公司与Ghent大学VIB研究所研制生产,整合了LED植物智能培养、自动 化控制系统、叶绿素荧光成像测量分析、植物热成像分析、植物近红外成像分析、植物高光谱分析、植物多光谱分 析、植物CT断层扫描分析、自动条码识别管理、RGB真彩3D成像等多项先进技术,以较优化的方式实现大量植物样 品——从拟南芥、玉米到各种其它植物的生理生态与形态结构成像分析,用于高通量植物表型成像分析测量、植 物胁迫响应成像分析测量、植物生长分析测量、生态毒理学研究、性状识别及植物生理生态分析研究等。

称重、成像、浇水植物表型成像系统

室内植物表型成像系统WIWAM Line

中度干旱胁迫下生长反应随时间变化的拟南芥的全基因关联图谱

大面积的可耕地经常面临不规则降雨,导致部分生长季节的可用水量有限,这就需要对植物的耐旱性进行研究。在324份拟南芥自然材料中,观察了中度干旱胁迫下生物量积累的自然变异。干旱胁迫下的改良表现与早花和缺乏春化需求相关,表明开花时间和干旱反应的调控网络重叠,或这些性状对自然选择的相关反应。此外,植株大小与相对含水量(RWC)呈负相关,与绝对含水量(WC)无关,表明可溶性化合物的作用显著。控制和干旱条件下的生长随时间而确定,并通过指数函数建模。通过对植物大小时间数据和模型参数的全基因组关联(GWA)作图,检测到六个与干旱密切相关的时间依赖性数量性状位点(QTL)。如果在单个时间点确定植株大小,大多数QTL将无法识别。对早期报道的干旱时基因表达变化的分析使我们能够确定每个QTL最可能的候选基因。

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图1. 莲座鲜重(FW)(a)、相对含水量(RWC)(b)和指数模型参数的频率分布

中度干旱胁迫下的生长减少导致实验期间对照植物和干旱处理植物之间的植物大小差异增加。在干旱处理开始两天后(第16 天),与对照相比,干旱导致的生长减少导致植株明显变小。最后,在中等干旱胁迫下生物量平均减少 35%。然而,在对照和干旱条件下的种质中观察到植物大小的很大差异(图 1a)。这些差异在很大程度上是由基因型决定的,因为在两种条件下,花环的PLA和FW都具有中等至高度的遗传力。

为了研究干旱条件下植物性能的自然变化是否与植物水分状况有关,在第24天测定每株植物最大叶片的RWC和WC。这两个参数代表水分状况的不同方面。 WC表示叶子中水的实际百分比,低 WC 表示叶子开始枯萎,代谢过程停止,从而阻止进一步的生长。另一方面,RWC 将实际 WC 与完全再水化叶子的 WC 进行比较。含有较少水或较多可溶性化合物或两者组合的叶子获得低 RWC。植物在可用水量有限的情况下保持高 WC 的策略之一是增加叶子内可溶性化合物的量,以改善流向叶子的水通量并限制蒸发。在应用的中度干旱条件下未观察到萎蔫,这对应于在干旱条件下观察到的所有植物的WC为75%或更高(图1b)。缺乏萎蔫证实达到了施加温和而不是严重干旱的目标。WC的变化是有限的;93% 的所有植物(包括对照和中度干旱处理的植物)的水平在88%和93%之间,表明RWC的差异在很大程度上是由于内部渗透势的变化。在对照和干旱条件下的种质之间观察到 RWC 的变化(图 1b)。

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图2.两个对干旱反应相反的材料在控制和干旱胁迫条件下的生长曲线

种质之间的差异不仅在两种条件下观察到植物大小,还观察到干旱响应,从在对照和干旱条件下具有相似生长的种质(图 2a)到最终莲座大小减少超过 50%(图 2b)。此外,观察到干旱时生长减少开始时间的变化。为了比较植物大小差异很大的种质对干旱的生长响应,本文计算了对照和干旱条件下植物大小之间线性回归的残差。残差代表在控制条件下与植物大小无关的干旱响应。正残差表示增长下降幅度小于平均值,而负残差表示增长率下降幅度大于平均值。

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图3.在第28天抽薹和不抽薹的植株之间的比较

早在第一个种质开始抽薹之前(从第11天开始),早抽薹个体和晚期抽薹个体之间的植物大小存在显著差异。在对照和干旱条件下,抽薹或开花植物在 28 天后具有比营养植物更大的莲座(图3a)。此外,以FW残差为代表的干旱响应在两个抽薹时间等级中是相反的(图3b)。早期抽薹种质在干旱时表现优于平均水平,而晚期抽薹型种质表现低于平均水平。当在冬季和夏季一年生植物之间进行相同的比较时,观察到类似的趋势。

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图4. Manhattan图表示单核苷酸多态性(SNP)标记与对照和干旱条件下的若干性状之间的关联,以及表示干旱响应的相应残差,与对照条件下的性状值无关

6个QTL与控制条件下的模型参数相关(图 4a),3个QTL 与控制条件下的FW和PLA相关(图4d)。在干旱条件下,三个 QTL与FWand PLA 相关(图 4e),另外三个与相应的残差相关(图 4f)。对于干旱条件下的模型参数和相应的残差(图 4b、c)、对照或干旱条件下的RWC或相应的残差(图4g),没有发现强关联。每个SNP可以解释总表型变异的6%到9%。对于与对照和干旱条件下的性状相关的SNP,该百分比处于相同的范围内。这些百分比强调生物量积累是一个复杂的性状,在控制和干旱条件下,它受许多小效应基因的调控。


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